中心實驗室現(xiàn)有分子生物學實驗室、流式細胞儀室、激光共聚焦顯微鏡室、動物操作室、病理學實驗室、細胞培養(yǎng)室、生物樣本庫、PCR實驗室等功能分區(qū),相關功能模塊設備介紹如下。
一、分析模塊設備
功能作用:
通過對細胞各種形態(tài)學參數(shù)和生物學特征、細胞生化成分組成及含量、細胞的各種功能、特定分子和離子的生物學變化等進行實時定量分析研究,建立涵蓋從細胞到組織水平的各種形態(tài)學科研技術和方法,從而更客觀地揭示生命活動的規(guī)律。
主要儀器:
1. 流式細胞儀:
品牌:BD 型號: FACSCanto II
主要參數(shù):
二激光8色:488nm藍/633nm紅
應用:
(1) 淋巴細胞亞群分析、免疫細胞分析,如樹突狀細胞,抗原特異性細胞,單核細胞等;
(2) 基因轉染,如熒光蛋白GFP/CFP/YFP等檢測以及FRET等蛋白間相互作用等研究細胞周期及倍體分析;
(3) 網(wǎng)織血小板及網(wǎng)織紅細胞分析;
(4) 白血病免疫分型;
(5) 干細胞及腫瘤干細胞分析,干細胞階段分化發(fā)育,以及分化發(fā)育的機制;
(6) 血小板活化、血小板自身抗體檢測;
(7) 移植中群體反應性抗體和配型檢測;
(8) 各種類型稀有細胞的檢測鑒定;
(9) 細胞凋亡、增殖和信號傳導;
(10) 可溶性蛋白質高通量測定,可溶性分子的研究,如細胞因子,趨化因子,磷酸化蛋白,凋亡相關蛋白等;
(11) 細胞功能檢測,如活化、細胞因子、磷酸化蛋白、膜電位、鈣流及pH值等檢測。
2. 徠卡SP8激光掃描共聚焦顯微鏡
品牌:Leica 型號: TCS SP8
主要參數(shù):
(1) 物鏡配置
N-SIM模式物鏡:100xSR復消色差TIRF物鏡
N-STORM模式物鏡:100xHP復消色差TIRF物鏡
(2) 激光器配置: 405nm、488nm、552nm、638nm激光器
(3) 為倒置型顯微鏡,可以兼容玻片、共聚焦皿等樣品載體
應用:
(1) 不同蛋白的共定位分析
(2) 多通道熒光檢測
(3) 細胞結構分析
(4) 動態(tài)跟蹤機體的精細結構和內(nèi)源性表達的熒光蛋白
(5) 三維圖像重建分析研究
3. 倒置熒光顯微鏡
品牌:Leica 型號: DMi8
主要參數(shù):
(1) 配備5 X, 10X,20 X, 40 X物鏡
(2) 手動同軸調焦,12mm調焦行程
(3) 具備明場、相差、熒光、攝像功能
(4) 具備快速熒光成像功能,進度<50ms,光閘切換<100ms
(5) 電動5檔熒光光強調節(jié)
(6) 配備LASX軟件,支持遙控控制
應用:研究細胞內(nèi)物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位
4. 全波長酶標儀
品牌:Thermo 型號: Multiskan Sky
主要參數(shù):
(1) 200-1000nm全波長掃描
(2) 可以應付幾乎所有的光度測量,包括DNA/RNA/蛋白質分析
(3) 支持終點法、動力學和光譜掃描三種測量方式
(4) 配備uDrop超微量檢測板,最小檢測體積2ul,同時也配備常規(guī)96孔/384孔板
應用:DNA、RNA 和蛋白質定量分析
5. 凝膠成像分析系統(tǒng)
品牌:Protein Simple 型號:Alphalmager HP
主要參數(shù)
(1) 用于熒光、可見光成像,具體支持各種熒光凝膠、蛋白PAGE膠、培養(yǎng)皿、多孔板等樣品類型,可以通過硬件升級以支持化學發(fā)光成像;
(2) 采用科研級別CCD,140萬像素,分辨率1360×1024;
(3) 檢測動態(tài)范圍為0 - 3.6 OD;
(4) F1.2、8-48 mm自動變焦鏡頭;
(5) 標配推拉式紫外透射光源,雙波長(302、365 nm)雙強度,以適合不同應用;
(6) 標配雙側反射白光光源,比單點式白光光源的光場更加均勻;
(7) 標配折疊式白光發(fā)光板(透射白光光源),用完可折放在暗箱內(nèi);透射成像面積為21×31cm;
(8) 具有打開暗箱門時的UV自動關閉功能,也可切換為在開門時進入切膠模式切膠;
(9) 拍照完畢后,光源自動關閉,無需人工干預;
(11) 具有紫外反射、藍光反射、藍光透射光源;
(12) 支持Movie連拍模式,并支持曝光時間疊加功能;
應用:
(1) 核酸檢測:EB,SYBR Gree,Radiant紅等染色的核酸膠檢測;
(2) 蛋白檢測:考馬斯藍,銀染,Sypro寶石紅染色的蛋白質膠檢測;
(3) 印跡膜:Western Blotting,Southern Blotting,Northern Blotting印跡以及雙向印跡膜;
(4) 其他:克隆及菌斑計數(shù)、細胞培養(yǎng)皿,細胞培養(yǎng)瓶,酶標板,TLC培養(yǎng)板,組織切片,載玻片,顯微照片等
6. 化學發(fā)光成像系統(tǒng)
品牌:Protein Simple 型號:FluorChem E
主要參數(shù)
(1) 支持化學發(fā)光、熒光、可見光成像;支持印跡膜、核酸膠,蛋白膠、多孔板、培養(yǎng)皿等樣品類型;
(2) CCD物理像素830萬;
(3) 有效分辨率為3326×2504;
(4) 硬件級灰度值為16 bit(0~65536級灰階);
(5) 檢測動態(tài)范圍為0~4.8 OD,檢測靈敏度可達低fg級水平
(6) 配備FluorChem E圖像捕獲軟件
應用:
(1) 核酸檢測:EB,SYBR Gree,Radiant紅等染色的核酸膠檢測;
(2) 蛋白檢測:考馬斯藍,銀染,Sypro寶石紅染色的蛋白質膠檢測;
(3) 印跡膜:Western Blotting,Southern Blotting,Northern Blotting印跡以及雙向印跡膜;
(4) 其他:克隆及菌斑計數(shù)、細胞培養(yǎng)皿,細胞培養(yǎng)瓶,酶標板,TLC培養(yǎng)板,組織切片,載玻片,顯微照片等
7. 超微量分光光度計
品牌:Implen 型號: N50 touch
主要參數(shù)
(1) 上樣量最低可達0.3uL。
(2) 固定光程原理:0.67mm和0.07mm
(3) 檢測范圍:dsDNA: 5-7500 ng/ul。
(4) 可檢測易揮發(fā)溶劑的樣品,以及表面張力大的樣品。
應用: 滿足對核酸、蛋白、菌液以及其他種類樣品的測量
8. 熒光定量PCR檢測系統(tǒng)
品牌:杭州博日 型號:FQD-96A
主要參數(shù)
(1) 樣本容量:96孔板、12×8聯(lián)管、96×0.2ml單管(底部透明)
(2) 動力學范圍:1~1010Copies
(3) 激發(fā)光波長:300-800nm
(4) 檢測波長:500-800nm
(5) 適用染料:F1: FAM, SYBR GreenⅠ; F2: VIC, HEX, TET, JOE, Cy3, TAMARA; F3: ROX TEXAS-RAD; F4: CY5; F5: CY5.5
(6) 模塊工作溫度:4~105℃(*小設置溫度:0.1℃)
(7) 升降溫速率:4.0℃/s (max)
(8) 控溫模式:BLOCK、模擬Tube模式(依據(jù)加液量自動控制)
(9) 加液量:5~100μL
(10) 梯度溫度范圍: 1~36℃
(11) 熱蓋溫度范圍:30~110℃
(12) 熒光強度檢測重復性:5%
(13) 掃描模式:全板掃描,指定行掃描
應用:
(1) 核酸定量分析。
(2) 基因表達差異分析。
(3) SNP 檢測。
(4) 甲基化檢測
(5) 產(chǎn)前診斷
(6) 病原體檢測:
(7) 腫瘤基因檢測
二、病理模塊設備
?功能作用:
通過取一定大小的病變組織,用病理組織學方法制成病理切片,用顯微鏡檢查病變,探討疾病發(fā)生的原因、發(fā)病原理和疾病過程中發(fā)生的組織和器官的結構、功能和代謝方面的改變及其規(guī)律。
主要儀器:
1. 全自動脫水機
品牌:Leica 型號:TP1020
主要參數(shù):
(1) 可容量80個標本
(2) 可作9個程序編寫,能自動操作
(3) 共12個反應缸,含有10試劑反應站及2個石蠟室
(4) 每站點能單獨設置
(5) 液晶顯示(LCD)的控制面板
(6) 能提供斷電情況下的標本保護
應用:用于組織梯度脫水,制備樣本
2. 石蠟包埋機
品牌:Leica 型號:HistoCore Arcadia H
主要參數(shù):
(1) 熱臺:
工作溫度:50℃至75℃,以1℃增幅進行調節(jié)
可拆卸式托盤:容納約150個包埋盒
石蠟缸:最多4 L
照明:白色 LED
顯示屏:5.7 英寸 LCD 電容觸摸屏
(2) 冷臺:
工作溫度:-6 ℃ (自調節(jié))
保證最低工作負荷量:30 分鐘凝固 65 個蠟塊
應用:用于制備石蠟切片樣本
3. 石蠟切片機:
品牌:Leica 型號:Histocore BIOCUT
主要參數(shù):
(1) 切片厚度
范圍: 1 - 60 µm
設置值:1 - 10 µm (1 µm 遞增)
10 - 20 µm (2 µm 遞增)
20 - 60 µm (5 µm 遞增)
(2) 修片厚度:
范圍: 10 µm、30 µm
應用:用于石蠟切片
4. 冷凍切片機
品牌:維格斯 型號:C5500
主要參數(shù):
(1) 切片厚度:
0μm~10μm,1μm步進量
10μm~20μm,2μm步進量
20μm~50μm,5μm步進量
50μm~100μm,10μm步進量
(2) 冷凍臺溫度最低可達:-45℃
(3) 冷凍室溫度設定范圍:-10~-30℃
應用:用于冷凍切片使用
5. 生物組織攤烤片機
品牌:金華華速 型號:HS-1145
主要參數(shù)
(1) 漂片,烘片,拷片三部分溫控范圍為:室溫-90℃
(2) 拷片室可容納3個30至40片的染色架,也可同時放入2個250ml的燒杯融蠟
應用:對標本進行漂片,烘片,拷片處理
三、樣品制備模塊設備
?主要儀器:
1. 旋轉蒸發(fā)儀:
品牌:上海亞榮 型號:RE-2000A
主要參數(shù)
(1) 旋轉瓶容積: 1L, 24#標口
(2) 收集瓶容積: 1L, 35#球磨口
(3) 旋轉速度: 0-180rpm
(4) 浴鍋控溫范圍:0-99℃, 控溫精度 ±1℃
應用: 用于回收、蒸發(fā)有機溶劑,快速液體樣品濃縮
2. 半自動固相萃取儀:
品牌:Phenomenex 型號:T12
主要參數(shù)
(1) 經(jīng)典的12管真空固相萃取裝置
(2) 標配流量閥,精確控制流速
應用:用于樣品的分離,純化和富集
3. 十萬分之一天平
品牌:Sartorius 型號:Quintix65-1CN
主要參數(shù)
(1) 稱重能力:60g
(2) 可讀性:0.01mg
(3) 重復性:0.02mg
(4) 線性:0.1mg
(5) 校準:內(nèi)部校準
應用:滿足實驗室精密稱量需求
4. 冷凍干燥機:
品牌:Labconco 型號: FreeZone
主要參數(shù):
(1) 容量為4.5L,配備12個歧管接口。
(2) 冷阱溫度可達-50℃。可干燥2L溶液/24小時。
(3) 可按鍵全自動控制致冷和抽真空,也可進行手動實現(xiàn)二者分別控制。
(4) 配備可伸縮排水管與冷阱底部相連,用于排除蒸發(fā)后的廢液。
(5) 具有自動除霜功能
應用:用于凍干樣本(溶劑為水,且不含酸堿)
5. 超純水機:
品牌:Think-lab 型號: Labonova Direct
主要參數(shù)
(1) 供水量:可達1.2 L/min,I類水供水量:可達7 L/h
(2) 25℃時的電導率:0.055μS/cm,25℃時的電阻率:18.2MΩ-cm
(3) TOC:<5 ppb,DNA酶:<5pg/ml,RNA酶:<0.5pg/ml
(4) 細菌:<0.1 cfu/ml,內(nèi)毒素:<0.001 EU/ml,大于0.2μm的顆粒/ml :<1
應用:同時提供純水與超純水,滿足實驗室各類實驗用水需求
6. 超聲波細胞破碎儀
品牌:Thermo 型號: 120 WATT
主要參數(shù):
(1) 處理量 0.2 ~ 100 mL
(2) 超載保護
(3) 脈沖模式(1 s 至 59 s)
應用:樣品制備
7. 微透析采樣設備
品牌:Harvard 型號: Pump 11 Elite
主要參數(shù):
(1) 搭配2.5ml 注射器
(2) 流速在 pl/min至ml/min范圍可調
(3) 雙通道
應用:微流體;腦內(nèi)注射;微透析采樣
8. 洗板機
品牌:科華 型號: ST-36W
主要參數(shù)
(1)板的類型:96孔板(U、V或平底板)
(2) 洗頭:8道或12道
(3) 液體容器:2L洗液瓶,2L廢液瓶
(4) 吸液模式:常規(guī)或清掃
(5) 殘液量:<2ul< span="">
應用:酶聯(lián)反應清洗酶標板
9. 腦立體定位儀
品牌:眾實迪創(chuàng) 型號: ZS-FD
主要參數(shù)
(1) 三維推進行程:≥80mm,操作臂移動范圍上下、左右、前后可達數(shù)值≥80mm
(2) 計數(shù)精度:±0.1mm, 移動距離讀數(shù)精度為10μm
(3) 適用于大小鼠
應用:腦立體定位
10.缺氧小室
品牌:StemCell 型號: 27310
主要參數(shù):
(1) 外形尺寸:直徑 31 cm;高 11 cm
(2) 內(nèi)部尺寸:托盤直徑:26.7 cm
(3) 容量:35-100 mm培養(yǎng)皿、96 孔板、培養(yǎng)瓶
應用:模擬缺氧環(huán)境
?四、細胞培養(yǎng)模塊設備
功能作用:
主要用于細胞培養(yǎng)及其他分子生物學實驗
主要儀器:
1. 生物安全柜
品牌:Haier 型號: HR1200-Ⅱa2
主要參數(shù):
(1) Ⅱ級A2型生物安全柜,30%氣體外排,70%氣體循環(huán)
(2) 雙人操作,工作區(qū)寬度≥1200mm
(3) 主過濾器:采用超高效過濾器ULPA,工作區(qū)潔凈度等級10級;
(4) 外排過濾器:采用高效過濾器HEPA,保證排放氣流的潔凈度優(yōu)于實驗室潔凈度要求
(5) 風速:平均送風風速在0.25~0.50m/s;吸入口風速≥0.5m/s;
應用:
(1) 原代細胞分離
(2) 細胞培養(yǎng)相關操作
(3) 其它分子生物學實驗相關操作
2. 二氧化碳培養(yǎng)箱
品牌:ESCO 型號: Celmate® CLM-170B-8-NF
主要參數(shù):
(1) 內(nèi)腔容積170L
(2) 可90℃高溫濕熱循環(huán)滅菌
應用:
(1) 原代細胞培養(yǎng)
(2) 細胞株培養(yǎng)
(3) 干細胞培養(yǎng)
3. 倒置顯微鏡
品牌:明美 型號: MI52
主要參數(shù):
(1) 目鏡:大視野WF10X/22,對中望遠鏡
(2) 物鏡:
無限遠長工作距離平場消色差物鏡 4X/0.10 工作距離:17.15mm
無限遠長工作距離平場消色差物鏡 40X/0.60 工作距離:3.5mm
無限遠長工作距離平場消色差相襯物鏡 10X/0.25 工作距離:4.3mm
無限遠長工作距離平場消色差相襯物鏡 20X/0.40 工作距離:8.0mm
應用:對活體細胞,透明液態(tài)組織進行顯微觀察,也可對培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)組織進行動態(tài)顯微觀察
4. 倒置顯微鏡
品牌:尼康 型號: TS2
主要參數(shù):
(1) 光學系統(tǒng):CFI60無限遠光學系統(tǒng),齊焦距離≥60mm;
(2) 透射光照明: 高亮度白色LED照明,60000小時壽命,帶“復眼透鏡”,使照明均勻;
(3) 目鏡筒:鉸鏈式雙目鏡筒;瞳距:50-75mm,45度水平方向傾角;
(4) 目鏡: 10x(視場22mm);
(5) 調焦方式:通過物鏡垂直移動實現(xiàn)調焦,向上7mm向下1.5mm;粗調行程每轉≥37.7mm,微調每轉≤0.2mm;帶粗調松緊度調節(jié)環(huán);
(6) 物鏡轉換器:五孔物鏡轉換器,后仰式;
(7) 聚光器: ELWD聚光器,數(shù)值孔徑0.3,工作距離75mm;
(8) 相差滑板:相差滑板(PHL,PH1,中空位);
(9) 可拆卸式移動載物臺:控制XY移動,移動范圍126 x 78mm;
10) 樣品夾:35mm培養(yǎng)皿;
(11) 物鏡:
①CFI 熒光相差物鏡4X(數(shù)值孔徑0.13,工作距離16.4mm);
②CFI切趾相差物鏡10X(數(shù)值孔徑0.25,工作距離6.2mm);
③CFI切趾相差物鏡20X(數(shù)值孔徑0.4,工作距離3.1mm);
④CFI切趾相差物鏡40X(數(shù)值孔徑0.55,工作距離2.1mm);
應用:對活體細胞,透明液態(tài)組織進行顯微觀察,也可對培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)組織進行動態(tài)顯微觀察
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